胎牛血清細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí),必須營(yíng)造一個(gè)與體內(nèi)相適應(yīng)的培養(yǎng)環(huán)境。細(xì)胞本身是一個(gè)生命,是組成機(jī)體的zui小生命單位,如果細(xì)胞長(zhǎng)期在較高內(nèi)毒素含量的培養(yǎng)基中生長(zhǎng),久而久之,細(xì)胞的正常生長(zhǎng)繁殖受到干擾,甚至zui終導(dǎo)致變異死亡。
為何牛血清中會(huì)污染噬菌體,其危害表現(xiàn)在什么地方
噬菌體是感染細(xì)菌的病毒,牛血清中污染噬菌體,表明該牛血清曾受到細(xì)菌污染,而受細(xì)菌污染過的牛血清,不僅對(duì)固有的營(yíng)養(yǎng)成分有所損害,更重要的是牛血清中會(huì)因細(xì)菌污染而含有許多毒素,對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)不利。牛血清是否污染噬菌體是檢測(cè)牛血清在整個(gè)加工過程中有否受到外源性污染的一個(gè)重要指標(biāo)。
胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中zui重要的原輔材料,牛血清若污染支原體會(huì)使培養(yǎng)的細(xì)胞受感染。導(dǎo)致細(xì)胞病變而死亡,使科研和生產(chǎn)工作無法繼續(xù)進(jìn)行。
胎牛血清冷凍管應(yīng)如何解凍
取出冷凍管后,必須立即放入37℃水浴中快速解凍,輕搖冷凍管使其在一分鐘內(nèi)全部融化,并注意水面不可超過冷凍管蓋沿,否則易發(fā)生污染情形。此外,冷凍管由液氮罐中取出解凍時(shí),必須注意安全,以預(yù)防冷凍管爆裂。
細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時(shí),是否應(yīng)馬上去除DMSO
除少數(shù)特別注明對(duì)DMSO敏感的細(xì)胞外,絕大部分細(xì)胞株(包括懸浮性細(xì)胞),在解凍之后,直接放入含有10%血清的新鮮培養(yǎng)基的瓶中即可。待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO,避免離心后損傷細(xì)胞。
培養(yǎng)原代細(xì)胞中出現(xiàn)小黑點(diǎn),可能是原代組織中的雜質(zhì),多次傳代可以消除。
胎牛血清細(xì)胞培養(yǎng)中如何防止黑點(diǎn)生成
1. 盡可能地減少血清凍融次數(shù)。
2. 培養(yǎng)基無需37℃水浴。
3. 培養(yǎng)基保持*PH值7.0- 7.2。
4. 嚴(yán)格控制配制培養(yǎng)基的水質(zhì),容器定期刷洗。
5. 胎牛血清掌握細(xì)胞傳代的*時(shí)機(jī),細(xì)胞切勿生長(zhǎng)過老。