對于胰酶HyClone的使用，使用者需要注意些什么？ 胰酶HyClone是一種自豬胰中提取的多種酶的混合物，主要為胰蛋白酶(將蛋白質消化成蛋白胨)、胰淀粉酶(將淀粉消化成糖)與胰脂肪酶(將脂肪消化成甘油和脂肪酸)。其通過在特定位置上降解蛋白，使細胞間結合處蛋白降解，這時細胞由于自身內部細胞骨架的張力作用下成為球形，從而使細胞分開。
不同的組織或者細胞對胰酶的作用反應不一樣。胰酶分散細胞的活性還與其濃度、溫度和作用時間有關，在pH為8.0、溫度為37℃時，胰酶溶液的作用能力zui強。使用胰酶時，應把握好濃度、溫度和時間，以免消化過度造成細胞損傷。因Ca2+、Mg2+和血清、蛋白質克降低胰酶的活性，所以配制胰酶溶液時應選用不含Ca2+、Mg2+的BSS，如:D-Hanks液。終止消化時，可用含有血清培養液或者胰酶抑制劑終止胰酶對細胞的作用。
胰酶HyClone使用注意
1.在使用胰酶細胞消化液的過程中要特別注意避免消化液被細菌、支原體污染。
2.胰酶細胞消化液消化細胞時間不宜過長，過長會損傷細胞，導致細胞鋪板后生長狀況較差。
貼壁細胞的消化
1.吸去培養液，用無菌的PBS、Hanks液或無血清培養液洗滌細胞一次，以去除殘余的死細胞/血清。
2.加入少量胰酶細胞消化液，略蓋過細胞即可，根據胰酶效率差異可以增加惑減少胰酶用量，室溫放置2-5分鐘(不同的細胞消化時間有所不同)。
3.顯微鏡下觀察，細胞明顯皺縮成圓形，并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變化呈白茫狀;或者在瓶壁上有部分成點狀區域細胞脫落;或者用手拍打克氏瓶正好能夠使細胞脫落;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來。
4.此時加入含血清的*細胞培養液停止消化，吹打下細胞，即可直接用于后續實驗;如果發現消化不足，則加入胰酶細胞消化液重新消化。鈣離子、鎂離子和血清蛋白的存在會降低胰酶活力。因此，胰酶HyClone溶液常用無Ca2+、Mg2+的D-Hanks’平衡鹽溶液配制成0.25%溶液。消化細胞時，加入一些血清或含血清的培養液，或胰蛋白酶抑制劑能終止胰蛋白酶對細胞的消化作用。
