MEM培養(yǎng)基它僅含12種必須氨基酸、谷氨酰胺和8種維生素。廣泛適用于各種已建成細胞系的培養(yǎng),同時添加或減少某些成分,也適于特殊細胞的培養(yǎng)。如Hela細胞、各種成纖維細胞、內皮細胞、人腫瘤細胞等。是哺乳動物細胞的理想培養(yǎng)基,通常用于貼壁細胞的培養(yǎng),通過對配方進行修正,可以用于其他類型細胞的培養(yǎng),如無鈣MEM培養(yǎng)基可以用于懸浮細胞的培養(yǎng),含有Hank’s鹽的MEM培養(yǎng)基可以用于二倍體細胞的培養(yǎng)。
配方
1配置前準備:配置MEM培養(yǎng)基新制備的milli water。調節(jié)pH值的酸堿溶液也應該使用這種水配置。制備培養(yǎng)基的器皿清洗干凈,并用milli water潤洗兩次。
2.溶解培養(yǎng)基:取5%終體積的milli water,加入到1L玻璃杯中,將干粉培養(yǎng)基倒入燒杯,水洗包裝袋內面兩次,倒入培養(yǎng)液中。磁力攪拌助溶。
3.補加試劑:根據(jù)包裝袋說明加入NaHCO3(2.2g),HEPES(2.383,10mmol)、非必需氨基酸(可不加,10ml)。
4.加抗生素:一般抗生素終濃度--青霉素100U/ml,鏈霉素100U/ml。1L加入10m儲備液。
5.調pH值:加水到1000ml,然后用HCL或者NaOH調節(jié)pH到7.2。
6.過濾除菌:采用0.22um濾膜。過濾后分裝于小瓶中(100或200ml)。過濾后pH值一般上升0.1-0.3。
7.加小牛血清:根據(jù)MEM培養(yǎng)基配置的量將小牛血清分裝,冷凍保存(-20度)。臨用前將加入小牛血清10%。