在細胞培養中,
BI胎牛血清的保存是至關重要的,它直接影響到細胞培養的質量和實驗的準確性。以下是關于如何保存BI胎牛血清的詳細步驟和注意事項:
一、存儲溫度
1.長期保存:BI胎牛血清需要長期保存時,應儲存于-20℃至-70℃的低溫冰箱中。這是為了確保血清中的活性成分在低溫下保持穩定,避免降解。
2.短期存放:若血清需要短期存放(如幾天到一周內使用),可放置于4℃冰箱中,但時間切勿超過1個月。長時間在4℃下存放會導致血清質量下降。
二、解凍與分裝
1.逐步解凍:從低溫冰箱中取出的血清,應先置于4℃冰箱中溶解1天,然后移至室溫下繼續溶解,直至溶解。在溶解過程中,需輕輕搖晃血清瓶,確保溫度與成分均一,減少沉淀的發生。
2.無菌分裝:血清溶解后,應立即進行無菌分裝。一般建議將40~45ml血清分裝于無菌的50ml離心管中,以減少反復凍融的次數,因為每次凍融都會進一步損害血清的質量。
三、避光與防止污染
1.避光保存:BI胎牛血清容器應避免直接暴露于光線中,因為光照可能會降解血清中的某些成分。可以使用不透明或具有遮光功能的容器來保存血清。
2.防止污染:在處理血清時,必須確保操作環境干凈,使用無菌技術和工具來避免細菌、真菌或其他污染物的引入。如果發現血清有懸浮物,應將其加入培養液內一起過濾,而非直接過濾血清。
四、注意事項
1.預留空間:由于血清在結冰時體積會增加約10%,因此在將血清放入低溫冰箱前,必須預留足夠的空間,以防止血清瓶因體積膨脹而破裂或造成污染。
2.避免熱滅活:除非必須,一般不建議對BI胎牛血清進行熱滅活處理。因為熱滅活雖然可以滅活血清中的補體成分,但也會顯著增加血清中的沉淀物,并影響血清的質量。
3.及時使用:解凍后的血清應盡快使用,避免長時間放置導致質量下降。同時,應避免反復凍融,以保持血清的最佳狀態。
通過正確的存儲溫度、解凍與分裝方法、避光與防止污染措施以及注意事項的遵循,可以確保BI胎牛血清在細胞培養中的質量和穩定性。