CCK-8試劑盒，是用于測(cè)定細(xì)胞增殖或毒性實(shí)驗(yàn)中活細(xì)胞數(shù)目的一種高靈敏度，無(wú)放射性的比色檢測(cè)法。
CCK法應(yīng)用非常廣泛，如藥物篩選、細(xì)胞增殖測(cè)定、細(xì)胞毒性測(cè)定、腫瘤藥敏試驗(yàn)以及生物因子的活性測(cè)驗(yàn)等。
操作步驟：
1、在96孔板中配置100μl的細(xì)胞懸液，將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱預(yù)培養(yǎng)24小時(shí)（在37℃，5%CO2的條件下）。
2、向培養(yǎng)板加入10μl不同濃度的待測(cè)物質(zhì)。
3、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱孵育一段適當(dāng)?shù)臅r(shí)間（例如6、12、24或48小時(shí)）。
4、向每孔加入10μlCCK-8溶液（注意不要在孔中生成氣泡，它們會(huì)影響OD值的讀數(shù)）。
5、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內(nèi)孵育1-4小時(shí)。
6、用酶標(biāo)儀測(cè)定在450nm處的吸光度，如無(wú)450nm濾光片，可以使用420-480nm的濾光片。
7、如暫時(shí)不測(cè)定OD值，打算以后測(cè)定的話，可以向每孔中加入10μl0.1M的HCL溶液或者1% w/v SDS溶液，并遮蓋培養(yǎng)板避光保存在室溫條件下，在24小時(shí)內(nèi)吸光度不會(huì)發(fā)生變化。
注意： 如果待測(cè)物質(zhì)有氧化性或還原性，可以加CCK之前更換新鮮培養(yǎng)基（除去培養(yǎng)基，并用培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次，然后加入新的培養(yǎng)基），去掉影像。 當(dāng)然影響比較小的情況下，可以不更換培養(yǎng)基，直接扣除培養(yǎng)基加入后的空白吸收即可。
400-0918-500
