蛋白酶K是一種從白色念珠菌分離出來的強(qiáng)力蛋白溶解酶,具有很高的比活性,是DNA提取的關(guān)鍵試劑。該酶在較廣的pH范圍(4?12.5)內(nèi)及高溫 (50?70°C)均有活性,用于質(zhì)粒或基因組DNA、RNA的分離。在DNA提取中,主要作用是酶解與核酸結(jié)合的組蛋白,使 DNA游離在溶液中,隨后用不同方法進(jìn)行 抽提,除去雜質(zhì),收集DNA。EDTA等螯合劑或SDS等去垢劑均不能使之失活。
蛋白酶K已廣泛應(yīng)用在皮革、毛皮、絲綢、醫(yī)藥、食品、釀造等方面。
1. 皮革工業(yè)的脫毛和軟化已大量利用蛋白酶,既節(jié)省時(shí)間,又改善勞動衛(wèi)生條件。
2. 蛋白酶還可用于蠶絲脫膠、肉類嫩化、酒類澄清。
3. 臨床上可作藥用,如用胃蛋白酶治療消化不良,用酸性蛋白酶治療支氣管炎,用彈性蛋白酶治療脈管炎以及用胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶對外科化膿性創(chuàng)口的凈化及胸腔間漿膜粘連的治療。
3. 加酶洗衣粉是洗滌劑中的新產(chǎn)品,含堿性蛋白酶,能去除衣物上的蛋白污物,但使用時(shí)注意不要接觸皮膚,以免損傷皮膚表面的蛋白質(zhì),引起皮疹、濕疹等過敏現(xiàn)象。
蛋白酶K的保存方法:
保存:保存在-20℃冰箱里,避免反復(fù)凍融,有效保證12月。
孵育溫度為55至65℃,理想孵育溫度為58℃,孵育時(shí)間為15分鐘至48小時(shí);理想孵育時(shí)間為2小時(shí)。