血清融化“三部曲”,能夠夠好的保存
提起血清融化,大家首先想到的方法就是4℃過夜法。
但由于血清融化過程中,蛋白比水先化,大量先化的蛋白和少量的水,靜靜地沉積在瓶子的底部,很容易導致一些蛋白飽和析出,(大多是脂蛋白和纖連蛋白),這就是血清融化中產生沉淀的重要原因之一。
注意!!
在水浴過程中,血清的平面要*浸在水中。在融化過程中要慢慢搖動,使血清混勻,但不要產生泡沫!
胎牛血清不推薦熱滅活。
1,事實上,這種沉淀表明我們的血清是高質量的,因為“生鮮冷凍沉淀”依然保留著。
2,這種冷卻的生鮮沉淀僅在人類或者其它哺乳運物的血清中和等離子當中存在,是經過迅速的無污染處理后,也對維護其蛋白或阻止污染的情況下,所謂的凝血因子VIII,凝血的血液或血清解凍時,才會產生這樣的白色沉淀纖維(纖維蛋白原)。
3,很多中方人員習慣于使用經過很多天反復凍融之后再處理,或者經過濾心過濾的血清才會說是污染的,實際上經過多次反復凍融處理的并經濾心過濾的血清已經失去了凝血因子VIII的作用了。
4,經過多次反復冰融及濾心過濾的血清實際上已經變得平庸了,變得失去了一些蛋白質,從而降低了促進細胞生長的素質或能力了。
5,當解凍血清使用時如果不再出現沉淀的話,是一個壞的征兆。